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如何选择合适的核酸提取仪

更新时间  2022-03 阅读 255

随着生物技术的快速发展,随着PCR技术在各个领域的应用,包括医学疾病检测、农业转基因检测等诸多应用,高通量的样品核酸提取变得极为迫切。很多公司都推出了全自动核酸提取仪,原理各种各样,有些很混乱,没用,还很贵。如何选择合适的自动核酸提取仪,需要仔细分析,才不至于花冤枉钱。


博科半自动核酸提取仪

核酸提取仪是利用配套的核酸提取试剂自动完成样品核酸提取的仪器。广泛应用于疾病控制中心、临床疾病诊断、输血安全、法医鉴定、环境微生物检测、食品安全检测、畜牧业、分子生物学研究等诸多领域。




核酸提取仪分类




1.根据不同尺寸的仪器。


1)自动液体工作站


自动液体工作站是一个非常强大的设备,它可以自动分配和吸取液体,甚至通过集成扩增和检测功能,实现标本提取、扩增和检测的全自动化。提取核酸只是其功能的一个应用,不适合常规的实验室提取核酸。一般适用于单一种类标本的实验要求,一次可抽取非常大量的标本(至少96个,一般为数百个)。自动化工作站平台的建立和运行需要相对较大的资金。


2)小型自动核酸提取仪


小型自动化仪器通过操作结构的特殊性,可以自动提取核酸,可以应用于任何实验室。


2.根据提取原理,可以分为不同的类别。


1)仪器采用离心柱法


离心柱法核酸提取仪主要采用离心机和自动移液装置的组合。通量一般为1-12个样本,操作时间与人工提取几乎相同。不能提高实际工作效率,而且贵。不同类型仪器的耗材不能通用,只适合资金充足的大实验室。


2)使用磁珠法的仪器


以磁珠为载体,基于磁珠在高盐低PH值下吸附核酸,在低盐高PH值下与核酸分离的原理,通过移动磁珠或转移液体即可实现核酸提取纯化的全过程。由于其原理的独特性,可以设计成多种通量,单管或8-96个样品即可提取。而且其操作简单快捷,提取96个样品仅需30-45分钟,大大提高了实验效率,成本低廉。因此可以在不同的实验室使用,是目前市场上的主流仪器。


自动磁珠法核酸提取仪可分为磁棒法和吸引法。


先说抽吸法:顾名思义,抽吸法是通过自动移液装置进行,通过加入裂解液和磁珠进行吸附;回收裂解液,加入冲洗液,磁珠吸附,回收冲洗液,加入洗脱缓冲液。从步骤上看似乎没有什么问题,但是吸法*大的问题是为了去除废液,移液管不能离磁珠太近,以免磁珠和废液一起被吸走,以至于每次抽废液总有一小部分吸不完,特别是底部有磁铁的装置。因为磁珠是被磁铁吸附在底部的,所以移液管不要太靠近底部,这样冲洗液就不能完全去除,残留的冲洗液中的盐和乙醇都会对其产生影响。磁体一侧的装置会有较少的残液,但洗脱效率也不好。要靠DNA自己溶解到洗脱缓冲液中,除非超过半小时。所以有的96自动核酸提取工作站一轮提取需要150分钟,32磁棒法同样的时间可以用五轮。


此外,磁棒法核酸提取仪:磁通通常有8、16、32和96个通道。磁棒法与抽吸法相比,优点是每一步的液体都不会残留,因为磁棒只是带走磁珠,转移到下一步对应的反应孔中。此外,采用磁棒法的萃取仪要有更完备的功能,比如加热,每个加热罐都要独立控温,这样可以设定加热和加热。此外,很重要的一点是,驱动磁棒的电机要能带动磁棒快速混合搅拌液体,有利于自动化和彻底裂解冲洗。磁棒法的通量选择*好是32通道,96通道的通量看似更高,但有一个很现实的问题。96个磁棒从一个盘子转移到另一个盘子,中间磁棒上的液体掉了怎么办?会掉落到其他孔中造成污染,而32道磁棒的轨迹并不经过其他样品上方,所以不会产生交叉污染。


概述了磁珠法kloc-2的基本原理。




1.抽吸法又称移液法,是通过固定磁珠,转移液体来提取核酸。一般通过操作系统控制机械臂来实现传送。提取过程如下:


1)裂解:向样品中加入裂解液,通过机械运动和加热使反应液混合并充分反应,细胞裂解,释放核酸。


2)吸附:在样品裂解液中加入磁珠,充分混合,利用磁珠在高盐、低PH值下对核酸亲和力强的特点吸附核酸,在外加磁场的作用下,磁珠与溶液分离,用吸头将废液罐中的液体去除,丢弃吸头。


3)洗涤:去除外磁场,用新的吸头加入洗涤缓冲液,充分混合,去除杂质,在外磁场的作用下去除液体。


4)洗脱:去除外磁场,用新的吸头加入洗脱缓冲液,充分混合,使结合的核酸与磁珠分离,得到纯化的核酸。


2.磁棒法


磁棒法是通过固定液体和转移磁珠来分离核酸。原理和过程与吸法相同,不同的是磁珠和液体的分离。磁棒法是通过磁棒吸附将磁珠从废液中分离出来,然后放入下一种液体中提取核酸。




磁珠法核酸提取仪的特点




1.它可以实现自动化和高通量操作。


2.操作简单快捷。


3.安全环保。


4.高纯度和高收率。


5.无污染,结果稳定。


6.成本低,便于广泛应用。


7.可以同时处理不同类型的样品。


需要注意的事项


1.仪器安装环境:正常大气压(海拔应低于3000米),温度20-35℃,典型使用温度25℃,相对湿度10%-80%,35℃或以下空气顺畅流入。


2.避免将仪器放置在热源附近,如电加热器;同时,为防止电子元件短路,应避免水或其他液体溅入其中。


3.进气口和出气口位于仪器背面,防止灰尘或纤维聚集在进气口,保持风道畅通。


4.核酸提取仪离其他垂直面至少10cm,


5.仪器接地:为了避免触电,仪器的输入电源线必须接地。


6.远离带电电路:操作人员不得擅自拆卸仪器,更换部件或机器内部调整必须由经过认证的专*维修人员完成。不要在电源打开时更换组件。