今天我们就来介绍核酸(DNA/RNA) 提取"柱提取"中最常用、最经典的提取方法之一，也就是-旋转离心柱提取方法。

核酸分为DNA和RNA。是PCR决心将其从临床标本中去除提取的前提。其实DNA和RNA 提取的基本思路是一样的，只是由于对样本的敏感性和处理中影响因素的差异，在具体的提取步骤或注意事项上还是有一些区别。

我们从复杂的临床标本中纯化了核酸 提取

①去除PCR抑制剂；

②增加目标物核酸的浓度，达到PCR的具体测定范围:

③提高样品的均匀性，保证测定的精密度和重复性。

PCR detection 核酸的理想样品制备方法应能满足上述三个要求。事实上，很多核提取方法都很繁琐、费时，或者很贵，或者提取样本达不到临床检测要求。

目前我们国内临床PCR 实验室。核酸 提取基本上是手动操作，这也是问题最多的环节。核酸 提取的方法有很多，但大致可以分为四类:

1.生化方法；

2.免疫学方法

3.物理方法；

4.生理方法。

接下来我们进入主题——旋转离心柱提取

旋转柱技术是一种从生物样品中分离纯化痕量核酸的简单方法，属于硅吸附法的一种。是欧美科学家从80年代后期开始研发的一种微量快速核酸分离纯化方法。克服了传统核酸纯化方法繁琐费时的缺点，更适用于涉及核酸需要大量微量核酸分离纯化的现代科学研究和临床检测工作。

它可以简单地分为三个部分:

第一部分是用裂解液破碎细胞，释放核酸 in细胞；

在第二部分中，释放的核酸被特定地吸附在特定的硅载体上。当然，这种载体只对核酸有很强的亲和力和吸附作用，但对蛋白质、多糖、脂类等其他生化成分既无亲和力也无吸附作用。

第三部分是洗脱核酸吸附在特定载体上，从而得到纯化的核酸。

每个商业套件的提取步骤大致相同:

临床标本的预处理

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加入蛋白酶K缓冲液、样本和裂解物，并充分混合。

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加入乙醇(无水乙醇更好)沉淀核酸

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转移样本(将样本从EP管转移到离心柱)

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洗涤(核酸吸附在硅柱上，洗去混合溶液中的杂质)

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洗脱核酸(TE缓冲液:Tris-HCl，EDTA，PH7.5~8.0)

硅胶柱核酸载体上的膜为人工膜，具有保存方便、重复可靠、稳定的特点。

我做实验 提取 核酸，也是用这个方法，简单快捷方便。

还有其他的核酸 提取方法，如:磁珠法、沸腾裂解法、玻璃粉吸附法、硅胶吸附法等。